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8-23
分子雜交儀是一種常用的實驗儀器,通過研究DNA和RNA序列的相互作用,幫助科學家揭示生物界中基本的謎題。本文將介紹分子雜交儀的工作原理、主要特點以及在生命科學研究中的重要應用。分子雜交儀的工作原理它主要利用DNA或RNA的互補配對原理。通過將待檢測的DNA或RNA序列與標記了熒光染料或放射性同位素的探針結合,形成雙鏈結構。當探針與待檢測序列發(fā)生互補配對時,可以通過檢測熒光信號或放射性衰減來確定目標序列的存在與數(shù)量。分子雜交儀的主要特點(1)高靈敏度:能夠檢測到極低濃度的目標D...
4-18
電穿孔儀電轉杯是一種靜電量測儀器,可用于表征各種物質的電性質和離子遷移。根據(jù)存在液體汞滴在水中扭曲外形所顯示出來的靜電現(xiàn)象而研制的。由三個主要組成部分組成:1.深度大約為11英寸的半球形玻璃罐;2.直徑約為7.5英寸的機械轉輪(或當量);3.一個用于連接罐口的支架。衡量介質表面張力和比表面積的實驗技術。它是利用物料接觸角與表面張力間的關系建立而來的。當電轉杯內加入了液體試樣時,如果注入量不超過10毫升,大約每20秒鐘推動一下轉鏡使其旋轉45度,并通過一個簡單的示波器實時記錄兩...
3-9
雙波懸浮細胞電穿孔儀是一種用于細胞轉染的儀器。在分子生物學和細胞遺傳學研究中,需要對細胞進行外源性DNA、RNA的導入,可以快速地實現(xiàn)外源性DNA、RNA等分子的導入,為科學家們提供了較為簡單細胞轉染手段。當然,在實驗過程中要注意安全規(guī)范,同時積極進行技術優(yōu)化與設備維護,以取得更加準確的實驗結果,以達到基因敲除、表達等功能,這就需要采用各種工具來完成細胞膜的穿透和細胞轉染。依靠高壓脈沖電場作用于細胞時產生的短暫通道效應將載體DNA或siRNA等物質導入到細胞內。雙波懸浮細胞電...
2-20
核酸分子雜交爐早期用于性病診斷的重組DNA技術。基本原理是具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定條件下(適宜的溫度及離子強度等)可按堿基互補原則形成雙鏈,此雜交過程是高度特異的。雜交的雙方是待測核酸及探針。待測核酸序列為性病病原體基因組或質粒DNA。探針以放射核素或非放射性核素標記,以利于雜交信號的檢測。所謂雜交(hydridization)指兩個以上的分子因具有相近的化學結構和性質而在適宜的條件下形成雜交體(hybrid),雜交體中的分子不是來自一個二聚體分子。同一個二聚體中的...
1-10
電穿孔效應是指在適當高壓脈沖電場作用下,細胞或組織間起相對隔離作用的“屏障”內快速形成液態(tài)通道的現(xiàn)象,是電場與具有不同介電常數(shù)而且易變形的物質相互作用的結果。從孔的形成、閥值跨膜電壓、膜損傷、分子運輸、組織穿孔、膜恢復和細胞死亡等方面論述了電穿孔效應的產生機理,并對電穿孔效應的應用進行了總結,在此基礎上,結合電穿孔生物效應實驗研究和應用特點,設計制作了一臺智能化電穿孔儀,該儀器具有矩形脈沖和電容放電脈沖兩種波形輸出,并且脈沖幅值、脈沖寬度、重復頻率可調。方波電穿孔儀的應用:哺...
12-8
紫外交聯(lián)是一種多用途的紫外輻射系統(tǒng),主要用于將DNA或RNA交聯(lián)到尼龍膜、硝酸纖維素膜上。交聯(lián)過程僅需25-50秒。傳統(tǒng)的方法是將膜置于真空烘箱中80℃烘烤2小時。與真空烘箱烘焙相比,紫外交聯(lián)儀照射可使雜交信號顯著增加。此外VL系列紫外交聯(lián)儀可用于Northern、Southernblotting、EMSA等膜交聯(lián),CLIP-seq、iCLIP-seq、PAR-CLIP-seq、pBpa、sulfo-SDA、psoralen等雙分子交聯(lián)以及微生物滅活(例如細菌,真菌,病毒),...
11-8
電穿孔儀電轉杯主要由兩個扁平的電極,一個帶有過濾功能并且散布有直徑大約為100nm納米孔的碳酸脂膜(PC膜)以及一個用來支撐兩個電極的支撐部分組成,在使用新裝置進行生物大分子的轉化時,先將需要傳遞的試劑加到底部的鈦電極上,之后立即將帶有膜的支撐部分放置到底部電極之上,接著第二片鈦電極被放到整個裝置的頂部,給兩個電極之間施加電脈沖,使細胞膜上形成納米孔,生物大分子得以進入細胞內部。電穿孔儀電轉杯為一次性消耗品,實際上維護得好的話可以多次重復使用為提高重復使用壽命,請大家注意:1...
10-19
分子雜交爐廣泛地使用于克隆基因的篩選、酶切圖譜的制作、基因組中特定基因序列的定性、定量檢測和疾病的診斷等方面。既可進行固相雜交或液相雜交,又可進行基因芯片雜交實驗;亦能作酶聯(lián)反應孵育器。其基本原理就是應用核酸分子的變性和復性的性質,使來源不同的DNA(或RNA)片段,按堿基互補關系形成雜交雙鏈分子(heteroduplex)。雜交雙鏈可以在DNA與DNA鏈之間,也可在RNA與DNA鏈之間形成。核酸分子雜交是基因診斷的基本方法之一。它的基本原理是:互補的DNA單鏈能夠在一定條件...